⑴ 什麼是無菌醫療器械，包括哪些方面。無菌是指產品製造過程中無菌還是指產品最終無菌
1.必要性：
①消毒滅菌效果監測方法專業性強，不檢驗不知道結果；
②新建病房、新消毒設備、新消毒劑均應做效果監測。
③特殊對象、特殊需要，必做效果監測。如移植術前、ICU病房、危重病人等。
2.科學性：以科學的試驗設計、熟練的技術、可靠的結果、確切地分析，得出結果評價。
3.規范性：以權威規范為依據，符合其基本原則要求。如檢測時機的確定、標准菌株的選擇、標本數、重復次數、實驗方法等確立。
二、監測方法的分類：
1、根據檢測方法性質分：
①物理方法：測量壓力滅菌溫度、測量紫外線強度等；
②化學方法：各種化學指示卡；
③生物方法：嗜熱/枯草芽孢滅菌效果監測自然菌存活數監測；
2、根據消毒滅菌對象性質分：
①空氣消毒：
②表面消毒：
3.根據具體消毒對象分：
①壓力蒸汽滅菌：
②各種器械：
③化學消毒劑：
④紫外線燈殺菌效果：
⑤手和皮膚消毒效果：
⑥空氣消毒效果：
⑦物體表面消毒效果：
三、必要條件：
1、專業實驗室：
2、必備設備器材：
3、選擇實驗方法：
4、熟練實驗技術：
四、衛生部對500張床位以上醫院感染管理的質量指標規定：
（1）醫院感染率≤10%；滅菌切口感染 ≤0.5%
（2）醫院感染的漏報率≤20%；
調查樣本量不少於年監測病人數的10%
（3）醫院必須對消毒、滅菌效果定期進行監測。
滅菌合格率必須達到100%
（4）使用中的消毒劑、滅菌劑應進行生物和化學監測。消毒劑每季度生物監測1次，細菌含量必須<100cfu/ml，不得檢出致病微生物；滅菌劑每月檢測1次，不得檢出微生物。化學監測應根據消毒、滅菌劑的性能定期監測。
（5）壓力蒸氣滅菌進行工藝、化學和生物監測。環氧乙烷必須每鍋進行工藝監測，每包進行化學監測，每月進行生物監測。壓力蒸氣鍋每天第一鍋必須做B-D試驗。
（6）紫外線燈強度監測：每季度1次；新燈管30W≥90µW/cm2,舊燈管≥70µW/cm2
（7）胃腸鏡等診療器材消毒標准不得檢出致病微生物；腹腔鏡、關節鏡等應滅菌處理，不得檢出任何微生物。
（8）進入人體組織、血液、器官的醫療用品應滅菌處理，不得檢出致病微生物；接觸黏膜醫療用品細菌總數≤20cfu/g（或100 cm2）；接觸皮膚的醫療用品細菌總數≤200cfu/g（或100 cm2），不得檢出致病微生物。
（9）母嬰同室、嬰兒室物體表面和醫護人員手不得檢出沙門氏菌。
（10）醫院各類環境空氣、物體表面、醫護人員手細菌數標准：
環境 類 別 空氣 物體表面 醫護人員手
cfu/cm3 cfu/cm2 cfu/cm2
Ⅰ類 層流潔凈手術室、 ≤10 ≤5 ≤5
潔凈病房
Ⅱ類 普通手術室、產房、 ≤200 ≤5 ≤5
嬰兒室、普通隔離病房
Ⅲ類 兒科、婦科檢查室、 ≤500 ≤10 ≤10
注射、換葯、治療、
急診、化驗、普通病房
Ⅳ類 傳染病科及病房 —— ≤15 ≤15
五、為保證醫院消毒滅菌可靠，應認真做好醫院消毒滅菌效果監測
1、影響消毒滅菌因素很多，使消毒滅菌效果難以保證。
2、消毒滅菌效果生物監測專業性強，條件難創造，結果評價難度大，實驗周期長。
3、化學測試試劑法較復雜，結果准確；試紙法簡便易行，但精確度較差。
六、壓力蒸汽滅菌效果的監測：
（一）BD試紙：
檢查滅菌器工藝狀態，並不能反應滅菌器使用中被滅菌物品的實際滅菌效果。發現陽性應進行滅菌器性能檢查調試。
（二）指示膠帶：
表示是否經過滅菌處理，並不能反應被滅菌物品實際滅菌效果。
（三）化學指示卡：
檢測每包被滅菌物品的滅菌效果。建議最好每包被滅菌物品中心放一片化學指示卡,待滅菌處理後,視其變色程度（滅菌效果）決定是否使用。
（四）用生物指示劑作系統監測：
採用生物滅菌指示劑來檢查壓力蒸汽滅菌效果是最科學、最可靠的監測方法。由中國預防醫學科學院流行病微生物研究所，北京鑫四環消毒技術開發中心聯合產銷的嗜熱脂肪桿菌芽孢（SS1，K31）是國際公認的標准菌株。現製成標准菌片，供檢查壓力蒸汽滅菌效果檢測。
w 菌株特點：
1、 該菌為需氧芽孢桿菌，細菌繁殖體G蘭氏染色陰性呈紫色，細菌芽胞孔雀綠著色。其細菌繁殖體對培養基要求低，在溴甲酚紫葡萄糖蛋白腖瓊脂上生長良好，表面粗糙呈米黃色。
2、最適生長繁殖溫度為56–65℃，培養24h即可形成菌落，37℃下24h看不到菌落。
3、 本生物指示劑載體為高級濾紙片，染菌量為5×105–106cfu/片，封裝在小紙袋內，熱死亡時間為121℃，3.9min陽性，19min陰性；D10值1.3–1.9min，符合美國葯典第十一版規定標准。該菌無毒，熱抗穩定，在冰箱內4℃下保存一年抗力無明顯下降，在常溫（20℃左右）可保存1個月。
w 使用方法：
1、 該芽孢菌片使用時將裝有菌片的小紙袋放在被滅菌的物品中心部位（每鍋放置菌片數按衛生部規定）。
2、 滅菌後，再無菌操作下取出小紙袋中的菌片， 投放到溴甲酚紫培養液管中。同時將未經滅菌的菌片投入另一管培養基中作對照。
3、 56℃–60℃培養，48h觀察結果，對照管為米黃色；若滅菌後菌片培養液顏色不變仍為淡紫色，為陰性（–），表示滅菌徹底；如變黃為陽性（+），表示滅菌不徹底。
w 培養基成分和配製方法：
1、成分：胰蛋白腖10g、葡萄糖5g、蒸餾水 1000ml、1.6%溴甲酚紫酒精溶液指示劑1ml。
2、配製方法：
（1）1.6g溴甲酚紫溶於98.4ml的96%酒精溶液中搖勻；
（2）把前三種成分溶解後，調解pH7.0-7.2，加入指示劑搖勻；
（3）每管分裝5ml，以121℃20min滅菌後，放4℃冰箱內保存，備用。
w 注意事項：
1、防止指示劑中酒精揮發而使溴甲酚紫含量過高（溴甲酚紫含量過高後可抑菌生長）；
2、菌片滅菌後應及時取出培養；
3、禁止菌片接觸任何消毒劑及放射源以免影響抗力。
七、化學消毒劑消毒效果監測：
（一）消毒劑有效含量的測試：
1、主要是有效含量不穩定的消毒劑，如過氧 乙酸、含氯消毒劑等應進行含量測試。
2、 化學試劑滴定法較復雜但結果精確；試紙法方便快速，但准確性差。專用測氯試紙——比較准確；復合測試試紙（可同測過氧乙酸、含氯消毒劑）——准確性較差。戊二醛試紙；含碘、臭氧等試紙尚待研究。
（二）化學消毒劑使用溶液污染菌數的檢測
1、選好用好中和劑：
2、做到：對應，濃度、比例合適
3、 中和劑選擇原則：
①本身對菌無影響
②確能去除殺菌因子
③生成物對菌無影響
④對照完全
★ 試驗分組：
① 菌液+葯液 培養
②（葯+菌液）+中和劑 培養
③ 中和劑+菌液 培養
④（葯+中和劑）+菌液 培養
⑤ PBS+菌液 培養
⑥ PBS 培養
⑦ 中和劑 培養
⑧ 培養基 培養
1）方法：
第一步： 用容量為1ml的滅菌吸管，吸取1ml消毒溶液。
第二步：將吸取的1ml樣液加入到9ml的稀釋液中，這個稀釋液的配製成分取決於消毒劑溶液的成分，即在生理鹽水溶液中加入合適的中和劑。
浸泡器械用消毒液缸 稀釋管 營養瓊脂平皿
圖1 Kelsey和Maurer提出消毒劑溶液在使用過程中的試驗
第三步：
將上述消毒稀釋液試管送到實驗室，從采樣到試驗時間不要超過1h，隨後用一支50滴/ml量的滴管 (出可用有0.02ml刻度的血清吸管），吸取混合液，在每一個營養瓊脂平板表面上（培養基平板表面上已無水分），滴10滴（每滴量為0.02ml），同樣滴二個平板。
第四步：
將二個平板分別孵育於二種不同溫度的孵箱內；一個放在37℃孵箱內1～2天；另一個平板孵育於20℃左右的室溫下3～7天，隨後計算二個平板上的菌落數，除以2，即得出每個平板上的平均菌落數。
2）試驗結果：
平板培養後有細菌菌落存在，表示消毒溶液中有細菌存在。若一個板上長1～2個菌落，可以忽略，因為消毒劑溶液畢竟是一種化學消毒劑，而不是滅菌劑，因此培養出極少量活菌是屬正常。若一個平板上生長5個或5個以上的菌落，則應注意這消毒劑溶液已被污染。從平板上檢出菌落數，可以計算出每毫升消毒溶液中存在的細菌數，其計算方法如下：
◆ 由於消毒樣液是按1：10稀釋，用50滴/ml的滴管滴10滴。如果10滴的消毒劑/稀釋液混合液生長了5個菌落，可計算出1ml消毒溶液中存在250個活菌。換句話說，在一個板上滴上10滴，它是1ml的1/5，因此計算如下：
5（一個平板上長菌落總數）×10（用消毒液稀釋10倍）×5（在平板滴10滴，只佔消毒劑/稀釋液混合液的1/5）=250個菌。
5×10×1=100個菌，即每毫升消毒液中存在的細菌數。若一個平板上長20個菌落，則每毫升消毒液中有5×10×5=250個細菌，這樣多的細菌，說明此消毒劑溶液已經失效，不能再使用
（見圖2）
圖2 平板上細菌的污染情況
每滴上各有少數菌落表示不能繼續使用
每滴上存在許多菌落表示嚴重污染
3）消毒劑溶液中長菌的原因:
消毒劑溶液中長菌，常見有下列幾種原因：
①容器沒有洗凈，未經加熱消毒處理。
②配製消毒劑溶液時，消毒劑和水量不準確， 使消毒濃度過低不能殺死細菌或抑制細菌。
③消毒劑溶液貯存過久，已經失效。
④由於過多的有機物質在消毒劑溶液中，消耗消毒劑而使消毒劑失效。
⑤在消毒劑溶液中存在著各種抑制消毒劑物質。
八、醫療器械滅菌效果的檢測：
采樣時間；在滅菌處理後，存放有效期內采樣。
（一）常規監測
1、檢測方法：縫合針、針頭、手術刀片等件醫療器械各5件，分別投入5ml的無菌洗脫液中。注射器則取5副在5ml無菌肉湯中分別抽吸5次。手術鉗、鑷子等大的醫療器械取2件，用棉拭子反復塗擦采樣，將棉拭子投入5ml無菌洗脫液中。振打80次,吸取1ml 接種平皿做活菌計數， 37℃培養48h，計算菌落數。
2、結果判定：平板上無菌生長為滅菌合格。
3、注意事項：若消毒因子為化學消毒劑時，
采樣液中應加入相應的中和劑。
（二）無菌檢驗
1、無菌檢驗前准備
（1）洗脫液與培養基無菌檢驗：無菌試驗前3天，於需-厭氧培養基中各接種1ml 洗脫液，分別至30~35℃與20~25℃培養72h，應無菌生長。
（2）陽性對照管菌液制備：試驗前一天取金黃色葡萄球菌（CMCC 26003）新鮮培養物，接種1環至需-厭氧培養基內，在30~35℃培養16~18h，用0.9％無菌氯化鈉溶液稀釋10cfu/ml備用。取生孢梭菌（CMCC 6494）的需氧菌、厭氧菌培養基新鮮培養物1環接種於相同培養基內，30~35℃培養16~18h，用0.9％無菌氯化鈉溶液稀釋10cfu/ml備用。取白色念珠菌（CMCC 98001）真菌瓊脂培養基斜面新鮮培養物1環，接種於相同培養基內，20~25℃培養24h，用0.9％無菌氯化鈉溶液稀釋10cfu/ml~10cfu/ml備用。
2、無菌操作：
（1）取縫合針、針頭、刀片等小件醫療器械5件直 接侵入6管需--厭氧培養管（其中1管作陽性對照）與4管黴菌培養管。培養基用量為15ml/管。
（2）取5副注射器，在5ml洗脫液中反復抽吸5次， 接種需-厭氧培養管（6管，其中1管作陽性對照）與黴菌培養管（共4管）。接種量：1ml注射器為0.5ml，2ml注射器為1ml，5~10ml注射器為2ml，20~50ml注射器為5ml，培養 基用量為2ml以下為15ml/管，接種量5ml為40ml/管。
（3）手術鉗、鑷子等大件醫療器械取2件用棉拭子塗擦采樣，投入5ml無菌洗脫液中，接種於需-厭氧培養管（6管，其中1管作陽性對照）與黴菌培養管（共4管）。接種量為1ml/管，培養基用量為15ml/管。
3、培養：將需-厭氧培養管以及陽性與陰性對照管均於30～35℃培養5天。黴菌培養 管與陰性對照管於20～25℃培養7天。
4、結果判定：陽性對照在24h內應有菌生長，陰性對照無菌生長，需-厭氧培養管及黴菌培養管無菌生長，可判為滅菌合格。
★ 如需-厭氧培養管及黴菌培養管中任何1管顯混濁並證明有菌生長，應重新取樣，分別復測2次，如各管無菌生長仍可判為滅菌合格。
5、注意事項：
（1）在潔凈度100級區域中進行，嚴格無菌操作。
（2）采樣後送檢時間不得超過6h，樣品保存於4℃，則不超過24h。
（3）如消毒因子為消毒劑，采樣液中應加入中和劑。
（4）采樣面積，100cm2。
（5）設好陽性、陰性對照。
九、手和皮膚消毒效果檢測：
1、采樣時間，在消毒後立即采樣。
2、采樣方法
（1）手，手曲面手指跟到手指端（一隻手約30cm2），采樣液10ml。
（2）皮膚，5cm×5cm 。采樣液10ml。
3、檢驗方法
取1ml采樣液做活菌計數，37℃培養48h。
4、采樣結果計算：
平板上菌落數 X 稀釋倍數
細菌總數（cfu/cm2）= ---------------------------------
采樣面積（cm2）
5、結果判定：
（1）I、II類區域工作人員，細菌總數 ≤5cfu/cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
（2）III類區域工作人員，細菌總數≤10cfu/cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
（3）IV類區域工作人員，細菌總數≤15cfu/cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
●母嬰同室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的工作人員，不得檢出沙門氏菌及其他致病菌。
6、注意事項：
（1）采樣器材應無菌。
（2）采樣液中應含相應的中和劑。
（3）陽性對照的設定問題。
（4）消毒時間要求，外科手消毒3分鍾、衛生手消毒1分鍾，皮膚消毒5分鍾。
十、物體表面消毒效果監測
1、采樣時間：消毒處理後采樣。
2、采樣方法
用5cm×5cm滅菌規格板，采樣面積≥100 cm2。門把手等不規則表面直接用棉拭子采樣。
3、采樣液10ml（含中和劑）。
4、檢驗方法：同上
5、結果判定：
（1）I、II類區域，細菌總數≤5cfu/cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
（2）III類區域，細菌總數≤10cfu/cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
（3）IV類區域，細菌總數≤15cfu/cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。母嬰同室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的物體表面，不得檢出沙門氏菌。
十一、空氣消毒效果監測
1、采樣時間：消毒後、操作前進行采樣。
2、采樣方法：
（1）布點：
室內面積≤30 m2，設內、中、外對角線3點，內外點距牆1m；室內面積 >30 m2，設四角及中央5點，四角點距牆1m。
（2）平板暴露法
平板直徑9cm、采樣高度1.5m，暴露5min。
3、檢驗方法
平板37℃培養48h。計數菌落數並分離致病菌。
4、平板暴露法結果計算
50000N
細菌總數（cfu/m3）= --------------------
A×T
A為平板面積（cm2）； T 為暴露時間（min）；N 為平均菌落數（cfu）
5、結果判定
（1）I、II類區域，細菌總數≤10cfu/cm3，並未檢出致病菌為消毒合格。
（2）III類區域，細菌總數≤200cfu/cm3，並未檢出致病菌為消毒合格。
（3）IV類區域，細菌總數≤500cfu/cm2，並未檢出致病菌為消毒合格。
6、注意事項：采樣前關好門窗，在無人走動的情況下，靜止10min 進行采樣。
十二、紫外線燈管強度的檢測：
1、紫外線是不可見光，紫光≠殺菌。
2、紫外線直射、折射。
3、紫外線穿透力弱。
4、殺菌紫外線為C波段，中心波長2537AO
5、紫外線殺菌劑量：強度 X 時間
6、檢測紫外線燈管強度的方法：紫外線強度儀；紫外線強度指示卡
7、紫外線燈管的質量：玻璃無氣泡、氣線；啟動快；不閃動；壽命長；照射強度標准：30W燈管新燈≥90µW/cm2；舊燈≥70µW/cm2
8、紫外線強度測試距燈光垂直100cm照射直接讀強度值。
注意：①作好防護：戴眼鏡、手套，必要時戴防護面罩。
②紫外燈管開啟後穩定5分鍾後，讀測試數值。
③紫外線強度變化與燈管質量電壓，反光罩光潔度等有關。
十三、幾點信息和看法：
1、對消毒技術和方法的評價問題：
1）含氯消毒劑的更替；
2）戊二醛和鄰苯二甲醛；
3）動態消毒機的效果評價；
4）臭氧消毒的優缺點(氧化作用突出)；
5）空氣和表面消毒相結合；
當然是兩者都有
⑵ 無菌手術包括哪些
無菌手術主要包括以下幾個方面：
1. 手術室環境：手術室必須保持高度清潔，通常為層流潔凈室，能有效過濾空氣中的微粒和微生物。
2. 手術人員准備：所有參與手術的醫護人員都需要進行嚴格的無菌技術操作，包括戴無菌手套、穿無菌手術衣、戴口罩和帽子，確保個人無菌。
3. 手術器械消毒：所有使用的手術器械必須經過高溫高壓滅菌或化學消毒劑處理，以確保無菌。
4. 患者准備：患者在手術前需要進行皮膚准備，通常使用抗菌皂液清洗手術區域，並可能使用抗生素預防感染。
5. 手術切口管理：手術切口的消毒和覆蓋無菌布單，手術過程中切口周圍的無菌維護也是非常關鍵的。
這些步驟都是為了創造一個盡可能無菌的環境，減少手術過程中的感染風險，保護患者的安全。在無菌手術中，任何可能引入細菌的行為都會被嚴格避免，以保證手術的成功和患者的康復。
⑶ 最大無菌屏障包括哪些內容
最大無菌屏障是在手術場合中用來防止污染的一種防護措施。它主要包括以下內容：
1. 無菌手套： 醫務人員在手術期間必須穿戴無菌手套。這些手套是一次性的，並經過高溫高壓滅菌處理，確保在手術期間無菌環境的保持。
2. 無菌衣物： 醫務人員需要穿戴無菌衣物，包括無菌隔離衣和無菌鞋套。這些衣物也需要經過有效的滅菌處理，以防止病原微生物的污染。
3. 無菌區域： 手術室和周圍環境被劃為無菌區域，醫務人員進入無菌區域前需進行嚴格的手部消毒，並採取一系列措施，如使用無菌巾擦拭工作檯面和手術器材等，以確保無菌環境的維持。
4. 無菌器材和物品： 手術器械、紗布、手術巾、敷料等必須經過滅菌處理，並嚴格按照無菌操作程序使用。醫務人員應避免直接接觸無菌器材和物品，以防止污染。
5. 消毒劑： 醫務人員在手術過程中使用消毒劑對皮膚和傷口進行處理，以減少細菌數量。這些消毒劑需要經過有效的消毒驗證，確保其起到預防感染的作用。
綜上所述，最大無菌屏障涵蓋了無菌手套、無菌衣物、無菌區域、無菌器材和物品以及消毒劑等內容，它們共同工作，以確保手術過程中的無菌環境，降低感染風險。